qPCR荧光定量检测
Real-time Quantitative PCR
实时荧光定量PCR(qPCR)是基因表达分析的金标准方法。赛瑞拓生物提供SYBR Green和TaqMan探针两种检测体系,支持相对定量和绝对定量分析。
工作流程
| 阶段 | 服务项目 | 周期 |
|---|---|---|
| Ⅰ RNA提取 | TRIzol/柱式法提取总RNA,NanoDrop检测纯度与浓度 | 0.5个工作日 |
| Ⅱ 反转录 | DNase I处理去除基因组DNA,随机引物/Oligo-dT反转录为cDNA | 0.5个工作日 |
| Ⅲ 引物设计验证 | qPCR引物设计,标准曲线验证扩增效率(90-110%) | 1个工作日 |
| Ⅳ qPCR检测 | SYBR Green / TaqMan探针法,三步法/两步法扩增 | 0.5个工作日 |
| Ⅴ 数据分析 | 2^(-ΔΔCt)相对定量分析,熔解曲线验证特异性 | 0.5个工作日 |
| Ⅵ 报告出具 | 完整实验报告含原始Ct值、扩增曲线、熔解曲线、统计分析 | 0.5个工作日 |
📦 交付标准:
- RNA质量检测报告(浓度、纯度、完整性)
- qPCR原始数据(Ct值、扩增曲线、熔解曲线)
- 相对/绝对定量分析报告(图表+统计分析)
🎯 服务保障:
承诺内参基因Ct值稳定(SD < 0.5),扩增效率在90-110%范围内。